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淺析ELISA試劑盒實驗中抗體效價的檢測方法

更新時間:2021-09-10      瀏覽次數(shù):802
  ELISA試劑盒實驗中抗體效價的檢測方法,在ELISA試劑盒實驗中,抗體的重要性關(guān)系到實驗能否成功,但是大多時候很多同學都沒有意識到,或者不知道怎么樣評價抗體的質(zhì)量,今天我們來了解一下有哪些方法可以檢測抗體的質(zhì)量,一般來說抗血清質(zhì)量的評價主要通過一下幾種方法
 
  放射免疫法:以不同稀釋度的抗血清與優(yōu)質(zhì)符號抗原混合,孵育24h后,測定其結(jié)合率。一般以結(jié)合率為50%的血清稀度和為效價。如某抗血清的結(jié)合率為50%時的稀釋度為1:15000,則該血清的效價就是1:15000??寡宓男r,除由抗血清自身的性質(zhì)決議外,還受符號抗原的質(zhì)量、孵育時刻,所用稀釋液的成分及其pH等要素的影響,在工作中有必要引起留意。
 
  雙向分散法:使用大分子抗原和抗體在瓊脂平板上分散,兩者在相交處發(fā)生沉積線,以調(diào)查和判別抗血清中是否有抗體及其濃度。
 
  球脂板的制備:100ml pH7.1 的磷酸鹽緩沖液加到15g的瓊脂內(nèi),于水浴中加溫,攪拌,使瓊脂*溶解,趁熱用紗布過濾,待溶液冷卻到65℃左右時,參加疊氮鈉,使其在溶液中的濃度為0.1%。用移液管把瓊脂放在潔凈平皿或玻片上,約3mm厚,待其冷卻,*凝固后,用打孔器打孔。中心孔內(nèi)加適量抗原,周圍各孔內(nèi)分別參加50μl 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32及不稀釋的抗血清,37℃下孵育24h,調(diào)查有無沉積線發(fā)生,以判別血清的稀釋度。
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